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單克隆抗體（mAb）能夠有效治療癌癥、自身免疫疾病、病毒感染及其他疾病。抗體治療藥物的新發(fā)展旨在增加更多的特異性結合域（雙特異性和多特異性），提高其有效性，和（或）將分子縮小為特異性結合域（如 scFv 或 Fab 片段），實現(xiàn)更好的組織滲透性。隨著分子變得愈加復雜，潛在的高／低分子量（H/LMW）雜質也變得愈加復雜。因此，為了準確分析各種分子，需要比 UV 更加先進的檢測方法來表征 mAb 樣品。

多角度光散射法（MALS）適用于測定樣品組分的分子量，更好地了解分子的聚集體和片段。MALS檢測的是分子被激光束擊中時的散射光。散射光的強度取決于分子的濃度和分子量。本文中，我們使用了TSKgel® UP-SW3000-LS 色譜柱和 LenS3 MALS檢測器針對 mAb 標準品進行分析。據(jù)此，我們展示了增加 MALS檢測器可以獲取哪些數(shù)據(jù)、方法的穩(wěn)健性如何、以及便于集成MALS 檢測進入 mAb 分析流程中的設備。

實驗條件：

為了展示 MALS 檢測與尺寸排阻色譜法聯(lián)用分析單克隆抗體的優(yōu)勢，我們采用了如下所述的mAb對照品和一種通用的分離方法。因為光散射對鹽晶體、微生物或色譜柱脫落物等顆粒比 UV檢測更加敏感，為了獲得高質量的 MALS 數(shù)據(jù)，采取了以下匹配措施：流動相兩次過濾；使用光散射專用 UHPLC 色譜柱（TSKgel UP-SW3000-LS），該柱曾與其他兩種色譜柱進行比較，其噪音水平低；選擇 LenS3 MALS 檢測器，其具有較高的靈敏度可以表征低豐度的雜質。

• Tosoh多角度激光光散射檢測器LenS3

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• UHPLC尺寸排阻色譜柱TSKgelUP-SW3000-LS

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